Test, altın parçacıklarına bağlı bağlayıcı reaktifleri kullanır ve iki aşamalıdır. Birinci aşamada, bağlayıcı reaktiflerin süt içeren antibiyotiklerle ön inkübasyonu, antibiyotiklerin bağlayıcı reaktiflerle etkileşimi ile sonuçlanır. İkinci aşamada, çözelti, sinyal gelişiminin meydana geldiği bir immünokromatografik ortama aktarılır. Bu ortamın ilk satırı, ön inkübasyon sırasında tetrasiklin antibiyotik ile etkileşime girmemiş tüm tetrasiklin bağlayıcı reaktifleri yakalar. İmmünokromatografik ortamdaki ikinci çizgi, testin kendisinin düzgün çalışmasını sağlamak için bir kontrol çizgisi olarak işlev görür ve ayrıca birinci ve üçüncü çizgiler için bir referans karşılaştırma işlevi görür. Bu ortamın üçüncü satırı, ön inkübasyon sırasında herhangi bir beta-laktam antibiyotik ile etkileşime girmemiş olan tüm beta-laktam bağlayıcı reaktifleri yakalar.